Thermocyclers
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Über Thermocyclers
Alle Cycler sind ergonomisch nach dem Eppendorf PhysioCare Concept® designt, um eine komfortable Bedienung zu ermöglichen. Dank des flexlid® -Konzepts können sie mit einer großen Auswahl an Gefäßen und Multiwell-Platten verwendet werden, ohne dass es beim Schließen des Deckels zu Verdunstung oder anderen unerwünschten Effekten kommt.
Um den Durchsatz im Labor noch weiter steigern zu können, sind all unsere PCR-Thermocycler auch als einfache, kosteneffiziente eco-Geräte erhältlich. Diese lassen sich auf einfache Weise mit einem Mastercycler-PCR-Thermocycler als Hauptgerät zu einem Netzwerk verbinden, in dem mehrere Assays gleichzeitig unabhängig voneinander über einen einzigen Touchscreen durchgeführt werden können. Und mit der Software CycleManager X50 können Sie die eco-Geräte der Serie X50 können sogar von Ihrem Schreibtisch aus steuern.
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Peltier-Elemente
Peltier-Elemente sind im Thermocycler für das Erhitzen und Kühlen des Metallblocks zuständig. Die Wärme des Metallblocks wird anschließend in die chemische Reaktion in den Kunststoffgefäßen eingeleitet. Fast alle aktuell auf dem Markt erhältlichen Endpunkt-PCR-Thermocycler nutzen Peltier-Technologie zum Erhitzen und Kühlen.
Hochwertige PCR-Peltier-Elemente sind äußerst langlebig und bieten eine sehr gute Temperaturleistung. Von unabhängigen Institutionen wie dem Fraunhofer-Institut durchgeführte Untersuchungen bieten objektivere Bewertungen als die Spezifikationen der Hersteller von Peltier-Elementen. In den Thermocyclern von Eppendorf werden Peltier-Elemente eines Anbieters eingesetzt, der zunächst vom Fraunhofer-Institut geprüft und verifiziert und anschließend im Rahmen eines strengen Auswahlprozesses aus den beiden besten Anbietern ausgewählt wurde.
Ein weiterer wichtiger Punkt ist, wie die Peltier-Elemente im Block montiert sind. Einfach ausgedrückt, besteht ein Thermoblock aus dem Aluminium-/Silberblock auf der Oberseite, den Peltier-Elementen in der Mitte und dem Kühlkörper unten. Diese drei Teile müssen zusammenmontiert werden.
Das Blockdesign des Eppendorf Mastercycler X50 basiert auf einer zentralen Fixierung und sechs einzelnen Steuerkreisen für höchste Temperaturgenauigkeit und Homogenität.
Der nächste Schritt in der Gradienten-PCR
Bei der Denaturierung von Vorlagen-DNA sollte die Denaturierungstemperatur einerseits nicht niedriger sein, als unbedingt nötig, um effizientes Primer-Annealing und effiziente Strangextension zu ermöglichen, aber andererseits auch nicht zu hoch, damit kein Verlust der Enzymaktivität auftritt, da sich die Halbwertszeit von Taq-DNA-Polymerase mit steigender Temperatur drastisch reduziert. Aus diesem Grund ist eine Betrachtung verschiedener Temperaturen während der PCR-Optimierung mithilfe eines Gradienten sinnvoll. Hierbei wird jede Spalte oder Reihe im Thermoblock eines Thermocyclers auf eine individuelle Temperatur gebracht, anstatt den gesamten Block auf dieselbe Temperatur zu bringen. Auf diese Weise sparen Sie viel Zeit und Aufwand.
Application Note No. 289 – Straightforward PCR optimization and highly flexible operation on the dual block thermocycler Mastercycler® nexus GX2
Laden Sie die Application Note zur PCR-Optimierung im Doppelblock-Cycler herunter:
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